Métabolisme et contrôle génétique

Activité respiratoire des levures et mutations

OBJECTIFS

Objectifs notionnels :

Les activités fondamentales des cellules telles que le métabolisme (…) sont sous le contrôle d’un programme génétique

Objectifs méthodologiques :

Concevoir un protocole ; utiliser l’outil informatique ; réaliser techniquement en suivant un protocole ; saisir les résultats par lecture de graphes ; adopter une démarche explicative.

MANIPULATIONS

Principe :

Comparer l’activité respiratoire d’une souche de levures présentant des mitochondries normales à celle d’une souche mutée caractérisée par l’absence de crêtes mitochondriales.

Matériel indispensable :

Interface Nortek et logiciel Winbio.
Sonde oxymétrique Jeulin, adaptateur pour interface Nortek.
Agitateur magnétique et barreau aimanté, petit cristallisoir.
Pillulier de 15 mL ou cytoréacteur Pierron.
Solution tampon phosphate pH 6.2 à 10 g.L^-1 de glucose, oxygénée à l’aide d’un aérateur d’aquarium.
Souches rho+ et rho- de levures sur gélose, en boîtes de Pétri.
Bécher de 100 mL, éprouvette graduée et petit entonnoir plastique.
Etaleur pour boïte de Pétri.
Aérateur d’aquarium terminé par un tube effilé.

Réalisation technique :

Voir la fiche technique sur le serveur SVT de l’Académie de Lille :

http://www4.ac-lille.fr/~svt/svt
(A faire levures rho+ et rho-).

TRUCS, ASTUCES, DIFFICULTES POSSIBLES

Les souches de levures peuvent être fournies par SORDALAB, de même que les milieux de culture pour la préparation des boîtes élèves par repiquage : voir le contenu du kit Sordalab «métabolisme des levures».